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紫外线与戊二醛协同杀菌效果的试验观察

作者:大江 | 时间:2014-10-4 20:34:35 | 阅读:455| 显示全部楼层

       伍碧雯 陈思东 宾羽琳 周紫宵

  提要 采用载体定量杀菌试验,观察紫外线与戊二醛协同杀菌效果。结果,以辐照度值为95 μW/cm2的紫外线与1.0%酸性戊二醛协同,对玻璃片与滤纸片上金黄色葡萄球菌、大肠杆菌作用0.5 min,对两片上枯草杆菌黑色变种芽胞作用10 min,杀灭率均≥99.9%;两因子单独作用则均达不到。
  关键词 协同杀菌作用  紫外线  戊二醛  金黄色葡萄球菌  大肠杆菌  细菌芽胞  枯草杆菌黑色变种

EXPERIMENTAL OBSERVATION ON SYNERGETIC BACTERICIDAL EFFICACY OF ULTRAVIOLET RAYS AND GLUTARALDEHYDE

Wu Biwen Chen Sidong Bin Yulin Zhou Zixiao
(Faculty of Preventive Medicine, Guangdong Pharmaceutical College,Guangzhou 510224)

Abstract Carrier quantitative bactericidal test was used to observe the synergetic bactericidal efficacy of ultraviolet rays and glutaraldehyde. The results indicated that combination of 95 μW/cm2 ultraviolet rays and 1.0% acidic glutaraldehyde with a 0.5 minute contact time killed ≥99.9% of Staphylococcus aureus and Escherichia coli on glass slide and filter paper and the same combination with a 10 minute contact time killed ≥99.9% of spores of Bacillus subtilis var. niger on these two carriers. Either of these two disinfecting agents alone could not attain such efficacy.
Key words synergetic bactericidal action  ultraviolet rays  glutaraldehyde   Staphylococcus aureus  Escherichia coli  bacterial spore  Bacillus subtilis var. niger

  某些化学消毒剂协同杀菌效果已有报 道〔1~4〕。我们对紫外线与戊二醛协同杀菌效果进行了试验观察。现将有关结果报告如下。
  
  1 方法
  1.1 试验菌片的制备
  试验菌为金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、大肠杆菌(ATCC 8099)、枯草杆菌黑色变种(ATCC 9372)芽胞。均制成含菌量为106~107cfu/ml的菌悬液。将0.05 ml菌悬液滴染于1.8 cm×1.8 cm玻璃片与2.0 cm×2.0 cm滤纸片上,置37℃干燥,制成菌片。
  1.2 中和剂选择试验
  试验菌为金黄色葡萄球菌。试验分组为:① 消毒剂+菌悬液;② (消毒剂+菌悬液)+中和剂;③ 中和剂+菌悬液;④ (消毒剂+中和剂)+菌悬液;⑤ 正常菌对照;⑥ 未接种菌的培养基对照。结果的判断,以第6组不长菌,第3、4、5组组间菌数相差不超过10%,第1组不长菌或菌数远少于第2组,第2组菌数≥100 cfu/ml时,证明所用中和剂及其浓度适宜〔5〕。
  1.3 载体定量杀菌试验
  单用紫外线照射时,将菌片置于距紫外线灯0.8 m工作台上照射(阳性对照不照射)。单用1.0%酸性戊二醛作用时,将菌片浸泡于该液(阳性对照为生理盐崐水)中。戊二醛与紫外线协同作用时,将菌片泡于1.0%酸性戊二醛溶液中,置紫外线灯下0.8 m处照射(阳性对照泡于生理盐水中,不经紫外线照射)。作用至预定时间,取出菌片,投入含2 ml中和剂的试管中。浸泡5 min,置振荡器中振荡20 min,以洗下菌片上的菌并混匀。取洗脱液作活菌计数,计算杀灭率。
  
  2 结果
  2.1 中和剂试验结果
  结果表明,用含1.0%卵磷脂、1.0%吐温80、3.0%甘氨酸和0.5%亚硫酸钠的水溶液中和1.0%酸性戊二醛,可符合规定的要求(表1)。

    表1 1.0%酸性戊二醛中和剂试验结果


组  别 平均菌数(cfu/ml)
 消毒剂+菌悬液
0
 (消毒剂+菌悬液)+中和剂
5 860
 中和剂+菌悬液
14 806 000
 (消毒剂+中和剂)+菌悬液
14 840 000
 正常菌对照
14 970 000
未接种菌的培养基对照
0

 注: 试验温度为20~22℃。消毒液加金黄色葡萄球菌后作用1 min。加中和剂后作用10 min。结果为5次试验平均值。2.2 杀菌效果
  单用辐照度值为95 μW/cm2的紫外线照射0.5 min,对玻璃片和滤纸片上金黄色葡萄球菌杀灭率分别为99.24%和99.10%,大肠杆菌杀灭率分别为99.41%和97.24%,照射10 min对两种片上枯草杆菌黑色变种芽胞杀灭率分别为50.00%和38.93%。单用1.0%酸性戊二醛作用0.5 min,对玻璃片和滤纸片上金黄色葡萄球菌杀灭率分别为99.67%和99.26%,大肠杆菌杀灭率分别为99.89%和97.12%,作用10 min对两种片上枯草杆菌黑色变种芽胞杀灭率分别为96.12%和95.13%。两者协同作用0.5 min,可将玻璃片上金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均杀灭99.99%,滤纸片上两菌杀灭率分别为99.95%和99.98%,作用10 min,可将玻璃片和滤纸片上枯草杆菌黑色变种芽胞分别杀灭99.98%和99.90%(表2)。
    表2 紫外线与戊二醛及其协同杀菌的效果
  

杀菌因子 不同载体上细菌的杀灭率(%)  
  玻璃片 滤纸片
  金黄色葡萄球菌  
 紫外线
99.24 99.10
 戊二醛
99.67 99.26
 紫外线+戊二醛
99.99 99.95
  大肠杆菌  
紫外线
99.41 97.24
 戊二醛
99.89 99.12
 紫外线+戊二醛
99.99 99.98
  枯草杆菌黑色变种芽胞  
紫外线
50.00 38.93
戊二醛
 96.21 95.13
 紫外线+戊二醛
99.98 99.90

 注: 试验温度为20~22℃。紫外线辐照度值为95 μW/cm2,消毒液为1.0%酸性戊二醛,对细菌繁殖体作用0.5 min,对枯草杆菌黑色变种芽胞作用10 min崐。阳性对照组平均菌数,玻璃片与滤纸片上金黄色葡萄球菌分别为196 000 cfu/片与130 000 cfu/片,两种片大肠杆菌分别为4 120 000 cfu/片与1 740 000 cfu/片,两种片枯草杆菌黑色变种芽胞分别为5 440 000 cfu/片与2 440 000 cfu/片。结果为3次试验平均值。

  3 讨论
  试验表明,辐照度值为95 μW/cm2的紫外线照射与1.0%酸性戊二醛协同作用,杀菌效果强于单用紫外线照射或1.0%酸性戊二醛作用。对细菌繁殖体协同作用0.5 min,对细菌芽胞协同作用10 min,杀灭率均≥99.90%。

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