大江 发表于 2014-10-2 07:39:05

膀胱移行细胞癌TGFβ1和TGFβ3的表达及临床意义

牛亦农 马庆铮 程继义 王万忠 杜德利

摘 要:目的:研究膀胱移行细胞癌(膀胱癌)组织中转化生长因子β1(TGF β1)与转化生长因子β3(TGF β3)的表达及其与肿瘤生物学行为的关系。方法:采用免疫组织化学技术ABC法对38例首发膀胱癌中TGF β1与TGF β3的表达进行检测。结果:高分化、浅表性、随访无复发的膀胱癌中TGF β1与TGF β3在胞浆中的表达显著高于低分化、浸润性、随访复发的膀胱癌。结论:胞浆内TGF β1与TGF β3可能在早期膀胱癌中起负性调节作用;TGF β1与TGF β3在胞浆中表达的降低或缺失可能导致膀胱癌恶性增殖与发展;TGF β1与TGF β3在胞浆中的表达水平可作为膀胱癌诊疗及判断预后的有用指标。
关键词:膀胱肿瘤 移行细胞癌 转化生长因子β 免疫组织化学技术

Expression of transforming growth factor β of transitional cell carcinoma and their clinical significance

NIU Yi-nong MA Qing-zheng CHENG Ji-yi
(Department of Urology,Shandong Provincial Hospital,Jinan,250021)
WANG Wan-zhong DU De-li
(Department of Pathology, Shandong Provincial Hospital)

Abstract:Purpose: To investigate the expression of transforming growth factor β1 (TGFβ1) and transforming growth factor β3 (TGFβ3) and their relationship to the biological behavior of bladder transitional cell carcinoma(bladder TCC). Methods:38 samples of primary bladder TCC were determined for their expression of TGFβ1 and TGFβ3 by ABC immunohistochemical staining. Results: The expression of TGFβ1 and TGFβ3 in patients with poor differentiated, invaded or recurring bladder TCC was lower than that in patients of well differentiated ,superficial or nonrecurring bladder TCC . Conclusions: TGFβ1 and TGFβ3 may be negative regulators for growth of bladder TCC. Decreased or deficient cytoplasm expression of transforming growth factor β may cause malignant proliferation and progression of bladder TCC.
Key words:Bladder neoplasm Transitional cell carcinoma TGFβ Immunohistochemistry▲

  转化生长因子β(TGF β)在人体内存在三种异构体形式,即TGF β1、TGF β2和TGF β3。其通过自分泌与旁分泌的方式,在不同类型、不同分化状态的细胞中发挥不同的生物学作用。TGF β对上皮细胞生长抑制作用的消失可导致肿瘤的发生与发展。近年来对TGF β与膀胱移行细胞癌(膀胱癌)关系的研究较少,且主要集中于TGF β1的研究。为了进一步探讨TGF β与肿瘤生物学行为之间的关系,我们应用免疫组织化学技术研究了TGF β1与TGF β3在首发膀胱癌组织及细胞中的表达,并探讨其临床意义。

1 材料与方法

1.1 研究对象
  选取首发膀胱癌石蜡包埋标本38例,男33例,女5例,年龄27~75岁,平均56.4岁。按WHO膀胱癌细胞分级标准,Ⅰ级10例,Ⅱ级19例,Ⅲ级9例。按1980年美国联合委员会膀胱癌分期标准,T1期15例,T2期12例,T3期11例。行膀胱部分切除术32例,膀胱全切除术6例。
1.2 免疫组织化学方法
  采用硫酸钾铝暴露抗原的免疫组织化学技术ABC方法〔1〕。兔抗人TGF β1与TGF β3多克隆抗体为Santa Cruz生物技术公司产品,ABC试剂盒为Vector公司产品。切片常规脱蜡至水,用0.3% H2O2阻断内源性过氧化酶10 min,用10%硫酸钾铝溶液于57 ℃暴露抗原30 min,用5%非免疫血清于37℃置放15 min,滴加一抗(1/50),置于4℃冰箱中过夜,余按常规ABC法进行。以已知阳性的前列腺癌切片为阳性对照,以PBS代替一抗,二抗为阴性对照。
1.3 结果判断
  随机选取5个高倍镜视野(10×40)进行判断,呈棕黄棕褐色为阳性染色。胞浆染色强度(A)分为0~3级,0级为阴性,1级为弱阳性,2级为中等阳性,3级为强阳性。阳性染色细胞百分比(B)亦分为0~3级,0级为≤5%,1级为5%~30%,2级为30%~70%,3级为>70%。按A×B计算,0级为阴性,1~3级为弱阳性,4~6级为阳性,7~9级为强阳性。
  细胞外间质染色的判断方法同胞浆染色。
1.4 统计学处理
  所得数据用SAS软件包中Pearson相关分析及Wilcoxon秩和检验进行处理。

2 结果

2.1 TGF β1和TGF β3在膀胱癌组织中的表达及其与膀胱癌分期和分级的关系
  TGF β1和TGF β3在膀胱癌胞浆及细胞外间质的表达结果详见表1。

   表1 TGF β1与TGF β3在膀胱癌组织中的表达  例


膀胱癌细胞 阴性 弱阳性 阳性 强阳性 阳性率(%)
TGF β1
 胞浆 17
16 5 0 55.26
 间质 11 21 6 0 71.05
TGF β3
 胞浆 5 19 11 3 86.84
 间质 10 22 6 0 73.68

  Pearson相关分析表明,TGF β1在胞浆的阳性表达与膀胱癌分级和分期之间呈高度负相关(r=-0.44737,P=0.0049;r=-0.56820,P=0.0002),TGF β3在胞浆的阳性表达与膀胱癌分级和分期之间亦呈高度负相关(r=-0.45184,P=0.0044;r=-0.51182,P=0.0010)。TGF β1和TGF β3在间质的阳性表达与膀胱癌分级和分期无显著相关性。
2.2 TGF β1和TGF β3在胞浆中的表达与膀胱癌分期、分级的关系
  TGF β1和TGF β3在胞浆中的表达与膀胱癌分期、分级之间的关系见表2~5。
  由表2~5可知,在浅表性膀胱癌(≤T1)与浸润性膀胱癌(≥T2)之间,TGF β1和TGF β3在胞浆中的表达前者显著高于后者(P<0.01)。

表2 TGF β1在胞浆中表达与膀胱癌分级之间的关系 例


分级 胞浆染色 秩和检验
P值
阴性 弱阳性 阳性 强阳性
G1 1 6 3 0 0.0269
G2 10 7 2 0 0.0087
G3 6 3 0 0 0.4158
合计 17 16 5 0
 

表3 TGF β1在胞浆中表达与膀胱癌分期之间的关系 例

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